BD FACS流式細(xì)胞儀

概述

BD FACSARIA III

BD FACSAria™ III 流式細(xì)胞儀具有諸多的技術(shù)，多色性能出色，其簡(jiǎn)便易用也為更多的科研工作者打開(kāi)了復(fù)雜的細(xì)胞分析的大門(mén)，成為流式的傳奇制作。其精心設(shè)計(jì)的液流和光路系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了信號(hào)檢測(cè)的最da化。光膠耦合石英流動(dòng)池以及八角形、三角形光路收集系統(tǒng)，整個(gè)系統(tǒng)具有超高的靈敏度和分辨率。

特點(diǎn)

液流系統(tǒng)

多色分析及分選性能

BD FACSAria™ III細(xì)胞儀的液流系統(tǒng)是由壓力驅(qū)動(dòng)的。正向空氣壓力使樣本細(xì)胞通過(guò)光膠藕合的石英杯流動(dòng)池。在流體力學(xué)的聚焦作用下，樣本顆粒形成單一液流通過(guò)流動(dòng)池，在流動(dòng)池中，激光束與樣本流正交。

光膠耦合的石英杯流動(dòng)池

BD FACSAria III的核心部位是石英杯流動(dòng)池，她與激光器以及光膠耦合的熒光收集光路一起構(gòu)成了一套真正的穩(wěn)定性光路系統(tǒng)。為了得到更高的靈敏度，BD FACSAria III安裝了新一代石英杯流動(dòng)池。它的設(shè)計(jì)幫助確保激光正好聚焦到樣本流上，這樣就可以產(chǎn)生zui強(qiáng)的信號(hào)，并收集到最多量的光信號(hào)。

穩(wěn)定性光路使開(kāi)機(jī)啟動(dòng)時(shí)間最短，并提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性，可以自動(dòng)化進(jìn)行每日質(zhì)控。更重要的是，它也提高了光信號(hào)收集效率，信號(hào)分辨率更好，特別適合多色應(yīng)用的需求，甚至在高速分選時(shí)同樣具有光信號(hào)的高靈敏度和分辨率。

廣受贊譽(yù)的可靠性和易操作性是該系統(tǒng)的特性

除其他功能外，BD FACSAria III中新一代流動(dòng)池的設(shè)計(jì)進(jìn)一步提高了側(cè)群細(xì)胞和細(xì)胞DNA周期分析的分辨率。

高性能分析，高性能分選

FACSAria III的分析性能，靈敏度，與最xin技術(shù)水平的分析型儀器的性能等同。這是因?yàn)槠溥\(yùn)用了與BD FACSCanto™ II和BD LSRFortessa™相同的光膠耦合流動(dòng)池設(shè)計(jì)和穩(wěn)定性光路結(jié)構(gòu)。

這種設(shè)計(jì)的光學(xué)結(jié)構(gòu)可以達(dá)到高數(shù)值孔徑光學(xué)收集。流動(dòng)池和噴嘴的設(shè)計(jì)能夠使顆粒在分析區(qū)域降低流速以便收集最多光信號(hào)，之后顆粒在通過(guò)噴嘴后在液流中加速，從而進(jìn)行高性能細(xì)胞分選。

由于BD FACSAria III光學(xué)和液流系統(tǒng)的精密設(shè)計(jì)，與傳統(tǒng)的空氣激發(fā)系統(tǒng)在相同的分析和分選速度時(shí)進(jìn)行比較BD FACSAria III有更杰出光學(xué)檢測(cè)靈敏度。

噴嘴適應(yīng)不同大小的顆粒

不同尺寸的噴嘴使用戶(hù)分選不同大小的樣本顆粒。噴嘴有四種尺寸可選:70微米、 85微米、 100微米和130微米。改進(jìn)的噴嘴設(shè)計(jì)使得更換更為方便，且安裝位置精確，不會(huì)發(fā)生偏差。這意味著在每次插入噴嘴后，可以得到可重復(fù)的液滴形態(tài)，不需要重新調(diào)節(jié)儀器設(shè)置，使儀器具有可重復(fù)的設(shè)置和校正狀態(tài)。軟件中包括了不同噴嘴的特異分選設(shè)置，使壓力及分選設(shè)置與使用的噴嘴相匹配。

方便的無(wú)菌設(shè)置和清洗程序

液流系統(tǒng)的創(chuàng)新，如易于插拔的噴嘴，自動(dòng)化的分選設(shè)置，易于更換的濾光片等，使儀器設(shè)置更為方便和快捷。液流設(shè)計(jì)的特點(diǎn)包括一體化閥門(mén)組合和簡(jiǎn)易高效的液流管路。軟件向?qū)篃o(wú)菌分選設(shè)置更簡(jiǎn)便和高效。此外，在樣本運(yùn)行后，樣本采集管內(nèi)外都會(huì)自動(dòng)進(jìn)行沖洗，達(dá)到最小殘留，消除樣本間的交叉污染。

BD Accudrop技術(shù)簡(jiǎn)化了液滴延遲時(shí)間的確定

BD FACS™ Accudrop技術(shù)幫助使用者可以看到正確的*液滴延遲值，而在以前，這是無(wú)法用肉眼實(shí)現(xiàn)的。軟件自動(dòng)化操作，簡(jiǎn)化了液滴延遲的確定。一旦液滴延遲時(shí)間被確定，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)調(diào)節(jié)并維持恒定的斷點(diǎn)，此技術(shù)稱(chēng)為Sweet Spot。如果遇到管路堵塞，系統(tǒng)將自動(dòng)停止分選，并保護(hù)收集管。

顆粒經(jīng)過(guò)流動(dòng)池后液流會(huì)加速通過(guò)噴嘴，并形成分選液滴。因?yàn)轭w粒的檢測(cè)在噴嘴上方，所以插入或移走噴嘴時(shí)，您都無(wú)需調(diào)整光路或液流。

光學(xué)特性

更高效的多色檢測(cè)

BD首chuang的在光學(xué)系統(tǒng)方面的革新設(shè)計(jì)能有效的最da化檢測(cè)信號(hào)，并在多色檢測(cè)中極大的提高每個(gè)顏色通道的靈敏度和分辨率。增強(qiáng)的靈敏度和分辨率意味著即便信號(hào)很弱的細(xì)胞群也可以輕易地被識(shí)別和分選。

光學(xué)系統(tǒng)方便優(yōu)化多色檢測(cè)和抗體組合的設(shè)計(jì)，以求達(dá)到*結(jié)果。用戶(hù)可以選擇照射樣本細(xì)胞的激發(fā)光波長(zhǎng)，以及引導(dǎo)散射光和熒光信號(hào)通過(guò)特定的濾光片到達(dá)檢測(cè)器的收集光路。激發(fā)光和收集光路上的創(chuàng)新設(shè)計(jì)在減小激發(fā)光損失的同時(shí)，也顯著改善了信號(hào)收集效率，從而使每個(gè)樣本都能獲取得到良好的信號(hào)。

激發(fā)光路

激發(fā)光路的組成包括:多根引導(dǎo)光纖、固定波長(zhǎng)的激光、光束整形裝置和消色差聚焦透鏡。各激光聚焦形成的光斑在空間上相互分離，并各自聚焦成形(9×65微米)。光斑聚焦越集中，熒光標(biāo)記的微粒通過(guò)激發(fā)點(diǎn)時(shí)產(chǎn)生的信號(hào)就越強(qiáng)。光膠耦合的熒光收集物鏡能最大限度的將發(fā)射光從檢測(cè)點(diǎn)傳遞給熒光收集光路。由于光路和樣本流均固定，儀器光路的正交狀態(tài)在不同實(shí)驗(yàn)、不同日期間一直保持不變。

杰出的靈敏度和分辨率

手動(dòng)調(diào)校光路會(huì)因?yàn)槊看握{(diào)校狀態(tài)不同而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果有變化。而固定光路設(shè)計(jì)避免了這種問(wèn)題，保證儀器光路穩(wěn)定，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不會(huì)有影響。

八角形檢測(cè)器中的光傳播路徑

收集光路

光纖將發(fā)射光從光膠耦合石英杯傳遞給檢測(cè)器接受裝置?；诎私切魏腿切卧O(shè)計(jì)的收集光路，能最大限度的檢測(cè)來(lái)自每個(gè)激光束照射點(diǎn)的信號(hào)，其原理是讓波長(zhǎng)最長(zhǎng)的光(光子能力最di)優(yōu)先透射進(jìn)入第一個(gè)光電倍增管(PMT)，并通過(guò)一系列的長(zhǎng)通二色分光鏡將較短波長(zhǎng)的光反射到下一個(gè)PMT下檢測(cè)器。

這一設(shè)計(jì)是根據(jù)光反射比光透射更有效率這一原理。熒光信號(hào)以反射的形式傳播到每一個(gè)PMT下檢測(cè)器，并在到達(dá)檢測(cè)器之前只通過(guò)2個(gè)濾片。因此可以在光信號(hào)損失最小的情況下完成熒光檢測(cè)。

裝置在每個(gè)PMT下檢測(cè)器之前的帶通濾鏡允許波長(zhǎng)范圍內(nèi)的熒光被收集。更重要的是，這種排列簡(jiǎn)化了光學(xué)陣列中濾鏡和分光鏡，濾光片更易更換，而且不需要任何校準(zhǔn)就可達(dá)到更強(qiáng)的信號(hào)強(qiáng)度。

精密的光學(xué)設(shè)計(jì)

BD FACSAria III光學(xué)系統(tǒng)方面的諸多革新設(shè)計(jì)，例如專(zhuān)li的光膠耦合石英杯、八角形檢測(cè)器和9×65μm大小的光斑，這些革新設(shè)計(jì)協(xié)同工作，以最大限度提高檢測(cè)靈敏度和分辨率。通過(guò)精密的設(shè)計(jì)產(chǎn)生出這樣一套更高效的光學(xué)系統(tǒng)，使得其能夠使用較低功率激光，無(wú)需通過(guò)單純提高激光器的功率來(lái)提升實(shí)驗(yàn)靈敏度和分辨率。而低功率激光又同時(shí)可以降低儀器運(yùn)作的總體費(fèi)用。

多色檢測(cè)

滿(mǎn)足當(dāng)前及未來(lái)需求

對(duì)于許多用戶(hù)而言，一臺(tái)gao端流式細(xì)胞儀的性能高低取決于其靈活性，而靈活性主要表現(xiàn)在能夠同時(shí)檢測(cè)的參數(shù)數(shù)量。BD FACSAria™ III可以支持六根激光器和四個(gè)獨(dú)立光斑。可選的激光器包括：633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。并具有同時(shí)進(jìn)行多達(dá)20個(gè)參數(shù)，18色的檢測(cè)能力，有著強(qiáng)大的靈活性。

可升級(jí)并向下兼容

用戶(hù)可以根據(jù)當(dāng)前和未來(lái)的需求以及預(yù)算情況來(lái)配置儀器。以后還可以通過(guò)升級(jí)服務(wù)來(lái)增加BD FACSAria III的激光器數(shù)量，以提升其能力。除此之外，BD FACSAria或者BD FACSAria II的用戶(hù)可以也通過(guò)升級(jí)服務(wù)獲得BD FACSAria III的新的功能。

方便日后升級(jí)，緊隨前沿技術(shù)

靈活設(shè)置你的 BD FACSAria III
最多同時(shí)安裝6個(gè)激光器，最高同時(shí)檢測(cè)18色，激光器可選:633, 561,488, 445, 405, 375 nm

更低的使用成本

與空氣中激發(fā)得分選方式相比，BD FACSAria III獨(dú)te高效的光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)使得使用成本降低。BD FACSAria III通過(guò)光纖來(lái)傳導(dǎo)固體激光器所發(fā)出的激光，從而實(shí)現(xiàn)了靈敏度和分辨率的最da化。

控制與分析

與其他BD流式細(xì)胞分析儀和分選儀完mei兼容

無(wú)論是BD FACSAria™ III的儀器設(shè)置、數(shù)據(jù)獲取或是數(shù)據(jù)分析，BD FACSDiva™軟件都能夠提供快捷有效的控制。BD FACSDiva軟件被廣泛地應(yīng)用于一系列BD的流式細(xì)胞分析和分選儀，包括BDFACSCant,和BD™ LSR系統(tǒng)等。研究者的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)更為靈活方便,可以將優(yōu)化好的實(shí)驗(yàn)條件和設(shè)置快速的轉(zhuǎn)移到另一平臺(tái)上。例如，分析實(shí)驗(yàn)的條件和設(shè)置可以輕松應(yīng)用于分選實(shí)驗(yàn)。

流式細(xì)胞儀的設(shè)置和追蹤

BD FACSDiva軟件具有儀器設(shè)置和追蹤(CS&T)功能，能夠幫助儀器完成基線設(shè)置，優(yōu)化儀器的靈敏度和熒光分辨率。從而大幅減少了由于操作者的主觀誤判帶來(lái)的結(jié)果錯(cuò)誤，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致穩(wěn)定。它使得用戶(hù)可以在儀器連續(xù)穩(wěn)定的前提下快速完成特定實(shí)驗(yàn)的條件設(shè)置。儀器狀態(tài)追蹤功能會(huì)監(jiān)測(cè)一系列儀器設(shè)置的數(shù)值，并給出狀態(tài)報(bào)告，大大簡(jiǎn)化了日常質(zhì)控的流程。Levey-Jennings圖譜可以幫助用戶(hù)了解他們的儀器狀態(tài)確定是否需要進(jìn)一步的維護(hù)處理。

流式細(xì)胞儀的設(shè)置和追蹤

分選前的快速簡(jiǎn)單準(zhǔn)備：
1. 打開(kāi)細(xì)胞儀
2. 開(kāi)啟液流
3. 自動(dòng)化完成儀器設(shè)置、質(zhì)控和液滴延遲優(yōu)化
4. 優(yōu)化樣品條件
5..分選開(kāi)始

數(shù)據(jù)獲取和分析

BD FACSDiva軟件使得科研工作者能夠使用自動(dòng)的數(shù)據(jù)獲取流程去完成多個(gè)數(shù)據(jù)的預(yù)覽和保存。軟件還能夠管理數(shù)據(jù)獲取模板、實(shí)驗(yàn)界面設(shè)計(jì)、以及補(bǔ)償程序，方便數(shù)據(jù)獲取。

為了高效便捷的分析，軟件提供了自動(dòng)設(shè)門(mén)方式、用戶(hù)可選的圖形結(jié)構(gòu)和批處理功能。存儲(chǔ)的數(shù)據(jù)可以通過(guò)圖形、門(mén)、群體層級(jí)以及統(tǒng)計(jì)結(jié)果，在同一張BD FACSDiva工作表上實(shí)現(xiàn)完整分析。一旦整體工作表被保存，可以被用來(lái)分析同一實(shí)驗(yàn)中的多個(gè)樣本管數(shù)據(jù)，從而大大節(jié)省時(shí)間。有助于提高效率的方式還有：用戶(hù)自定義的批處理分析、自動(dòng)化的設(shè)門(mén)調(diào)整、在分析不同數(shù)據(jù)間暫停、輸出統(tǒng)計(jì)結(jié)果、在進(jìn)到下一個(gè)數(shù)據(jù)文件前打印結(jié)果等等。

數(shù)字化電子系統(tǒng)

光膠耦合的石英杯流動(dòng)室和電子處理系統(tǒng)協(xié)同作用下，每個(gè)檢測(cè)顆粒的信息最da化。電子采樣速率和顆粒在流動(dòng)室中的流動(dòng)速度精確匹配。每秒70,000個(gè)顆粒的上樣速度下，采集到的數(shù)據(jù)保證了線性度和精確性。

BD FACS流式細(xì)胞儀